聚焦

全二维气相色谱技术在痕量污染物分析中的应用进展

郑明辉, 吴嘉嘉

(中国科学院生态环境研究中心, 北京 100085)

该文无摘要内容

特别策划 引言

色谱技术在生化检验中的应用

林金明

(清华大学化学系, 北京 100084)

该文无摘要内容

近期微流控芯片疾病诊断技术的研究进展

李海芳1, 张倩云1,2, 林金明1*

(1. 清华大学化学系, 北京 100084; 2. 北京化工大学理学院, 北京 100029)

摘要: 微流控芯片具有液流可控、样品消耗量小、反应速度快、易于集成化等特点,在临床诊断和疾病筛查领域具有广阔的发展前景。本文针对近年来微流控芯片技术在疾病诊断方面的最新研究进展,从疾病标志物检测、细胞筛选和药物代谢研究及疾病诊断微流控芯片装置的发展现状等方面概述其在疾病诊断方面的应用和发展。

关键词: 微流控芯片;疾病诊断;肿瘤;传染病;甲状腺;性激素;细胞

文章编号: 1000-8713(2011)04-0284-09

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12902.shtml  

基于质谱检测的相关色谱技术在阿尔茨海默病诊断中的应用

王鼎乾, 辛贵忠, 石子琪, 陈君*, 李萍*

(现代中药教育部重点实验室 中国药科大学生药学教研室, 江苏 南京 210009)

摘要: 随着世界老年人口的急速增长,阿尔茨海默病发病人数也逐年增多,已成为继心脑血管疾病和恶性肿瘤之后威胁人类健康的“第三大杀手”。疾病的诊断和治疗同等重要,阿尔茨海默病诊断通常依靠典型的临床特征、神经影像技术以及检测疾病相关的生物标志物等。近些年来蛋白质组学和质谱技术迅速发展,可以利用这些技术寻找到与疾病相关的特异性的蛋白质分子作为早期诊断的生物标志物。本文就此进行了综述,主要包括基于蛋白质组学的诊断标志物的筛选和基于质谱检测的色谱技术在阿尔茨海默病诊断中的应用,引用文献34篇。

关键词: 质谱;色谱技术;阿尔茨海默病;生物标志物

文章编号: 1000-8713(2011)04-0293-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12901.shtml 

毛细管电泳技术在重大疾病特异性蛋白质分析中的应用

钱金雄, 杨秀娟, 陈缵光*

(中山大学药学院, 广东 广州 510006)

摘要: 人类重大疾病特异性蛋白质的识别、鉴定等是目前生命科学亟待解决的问题。毛细管电泳技术用于蛋白质分析,具有装置简单、分析速度快、试剂和样品消耗少以及有多种分离模式和检测手段等特点。本文综述了毛细管电泳技术在人类重大疾病特异性蛋白质分析中的应用,包括肿瘤疾病、神经退行性疾病和输血性传染病等的特异性蛋白质检测。

关键词: 毛细管电泳；蛋白质；疾病

文章编号: 1000-8713(2011)04-0298-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12882.shtml 

芯片自由流电泳的研究进展

王平利, 梁振, 张丽华*, 单亦初, 张玉奎

(中国科学院大连化学物理研究所, 中国科学院分离分析化学重点实验室, 国家色谱研究分析中心, 辽宁 大连 116023)

摘要: 芯片自由流电泳(μ-FFE)是一种连续微制备或预分离技术,已在细胞、细胞器、蛋白质等生物样品的分析中发挥了重要作用。本文系统综述了μ-FFE的研究进展,侧重于介绍各种自由流芯片的结构、分离模式和应用。此外,还对μ-FFE的发展方向进行了展望。

关键词: 自由流电泳;芯片;综述

文章编号: 1000-8713(2011)04-0303-04

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12903.shtml 

基于液相色谱与质谱联用的代谢组学及磷脂轮廓分析在糖代谢异常研究中的应用

赵素敏1,3, 郑虹2, 路鑫1, 刘颖2, 苏本利2, 许国旺1*

(1. 中国科学院分离分析化学重点实验室, 中国科学院大连化学物理研究所, 国家色谱研究分析中心, 辽宁 大连 116023; 2. 大连医科大学附属第二医院, 辽宁 大连 116023; 3. 中国科学院研究生院, 北京 100049)

摘要: 糖代谢异常由于其发病率的升高和影响人类的生活质量而日益受到科学研究者的关注。实验中利用液相色谱与质谱(LC-MS)联用技术对糖代谢异常分别进行了代谢组学和磷脂轮廓分析,研究了糖代谢异常中的两个阶段——空腹血糖受损(IFG)和初诊糖尿病(NDD)的代谢差异情况。首先从LC-MS采集到血浆中代谢组学分析及磷脂轮廓分析的原始谱图,通过软件的峰匹配等步骤得到峰表,之后利用多种统计分析方法进行数据分析,通过正交校正的偏最小二乘法(OSC-PLS)对样品进行分型,根据模型的变量重要因子(VIP)、显著性差异检验结果等筛选出差异性代谢物。结果显示: NDD组比IFG组与对照组(N组)比较存在更明显的代谢差异,发生变化的化合物主要为游离脂肪酸、溶血磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂和磷脂酰胆碱等。

关键词: 液相色谱-质谱联用;糖代谢异常;空腹血糖受损;初诊糖尿病;代谢组学;磷脂轮廓分析

文章编号: 1000-8713(2011)04-0307-07

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12918.shtml 

液相色谱-质谱联用系统在肝硬化不同阶段代谢轮廓研究中的应用

杜振华1, 张磊2, 刘树业2*

(1. 天津医科大学三中心临床学院, 天津 300070; 2. 天津市第三中心医院, 天津市人工细胞重点实验室, 天津 300170)

摘要: 采用高效液相色谱-轨道离子阱质谱联用(HPLC-LTQ Orbitrap XL MS)代谢组学研究平台分析不同阶段肝硬化病人和健康人群的血清标本,获取代谢轮廓。采用模式识别方法结合非参数检验对数据进行分析。研究发现,由肝硬化A级组、B级组、C级组和健康对照组的代谢轮廓构建的正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型(R2（Y）=90.1%, Q2=66.7%),对检测组数据的预测准确率达到93.8%,具有很好的判别能力。从代谢轮廓中可以鉴别出用于区分不同疾病阶段的特异性代谢标志物,如溶血磷脂酰胆碱、甘氨鹅去氧胆酸、半胱氨酸、甘氨酸、氨基己二酸、哌可酸等。研究结果表明: 利用代谢组学方法获得的血清代谢轮廓可以用来构建区分模型和寻找代谢标志物,为乙肝肝硬化的诊断和监测提供支持和依据。

关键词: 液相色谱-质谱联用;正交偏最小二乘判别分析;乙肝肝硬化;代谢轮廓;代谢组学;血清

文章编号: 1000-8713(2011)04-0314-06

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12857.shtml 

代谢组学应用于糖肾方治疗糖尿病肾病的疗效评价

于欢1,2, 黎莉2, 梁琼麟2*, 王义明1,2, 李平3, 罗国安1,2*

(1. 江西中医学院, 江西 南昌 330004; 2. 清华大学分析中心, 北京 100084; 3. 中日友好医院, 北京 100029)

摘要: 建立了基于超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TOF MS)分析技术的血浆代谢指纹谱,应用多元统计分析方法评价糖尿病肾病患者血浆代谢物变化差异及糖肾方的干预效果。通过研究糖肾方干预糖尿病肾病血浆内源性代谢物的变化,探索与该疾病密切相关的代谢途径,评价糖肾方的治疗效果。结果发现: 经糖肾方治疗后,血浆内源性代谢物发生了明显变化,磷脂代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢、嘌呤嘧啶代谢、固醇类代谢等多个代谢途径得到纠正。本研究基于UPLC/TOF MS的代谢组学方法,能够从整体水平反映疾病治疗过程中代谢网络的变化趋势,证实糖肾方具有治疗糖尿病肾病的临床疗效并有助于阐释药物作用机理。

关键词: 超高效液相色谱-飞行时间质谱;代谢组学;糖肾方;糖尿病肾病

文章编号: 1000-8713(2011)04-0320-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12917.shtml 

高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱法检测芥子气经皮肤染毒SD大鼠肺中的DNA加合物

岳丽君, 魏玉霞, 陈佳, 林妮妮, 王瑞, 杨茜, 张雅姣, 谢剑炜*

(军事医学科学院毒物药物研究所, 北京 100850)

摘要: 运用高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)技术,建立了快速、简单、灵敏的SD大鼠肺中N7-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤(N7-HETEG)的检测方法。以N7-苯甲基鸟嘌呤为内标,用甲醇和水为流动相进行梯度洗脱,正离子模式检测,方法的检出限(信噪比(S/N)≥10)为300 pg/mL,定量限(S/N≥20)为850 pg/mL。在300 pg/mL～1.28 μg/mL的质量浓度范围内,N7-HETEG浓度与N7-HETEG和内标的峰面积比呈良好的线性关系(线性相关系数为0.9929)。高、中、低3个添加水平的日内测定精密度(以相对标准偏差(RSD)计)和日间测定精密度均小于10%(n=7),回收率为100%～132%。对SD大鼠背部皮肤染芥子气,剂量分别为5.5、11、22和45 mg/kg,染毒4 d后检测大鼠肺脏中N7-HETEG的含量。各个不同染毒剂量下,每克组织中分别检测到（0.56±0.16）、（0.67±0.12）、（1.36±0.68）和(5.14±0.92) ng N7-HETEG, N7-HETEG的含量随着染毒剂量的增大而增大,表明N7-HETEG可用作芥子气暴露的体内生物标志物。

关键词: 高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱;N7-(2-羟乙基硫代乙基)鸟嘌呤;芥子气;皮肤染毒;肺;SD大鼠

文章编号: 1000-8713(2011)04-0325-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12868.shtml 

氨基酸消耗谱在区分不同作用机制抗癌药物中的应用

韩晓菲, 王龙星, 杨乾栩, 肖红斌*

(中国科学院大连化学物理研究所, 辽宁 大连 116023)

摘要: 以邻苯二甲醛为衍生试剂,正缬氨酸为内标,采用柱前在线衍生高效液相色谱(HPLC)分离,荧光检测(FLD)的方法,建立了培养基中游离氨基酸(FAA)代谢消耗谱的定量分析方法。流动相A液为10 mmol/L Na2HPO4-Na2B4O7缓冲液(pH 7.95), B液为乙腈-甲醇-水(45:45:10, v/v/v);二元线性梯度洗脱,流动相B在35 min内由5%升至52%,33 min内17种FAA全部得到良好分离。应用该方法分别测定了HeLa细胞在紫杉醇和丝裂霉素干预24 h后的培养基氨基酸代谢消耗谱(以正常培养组为对照)。以相对峰面积作为原始数据,通过Matlab7.1软件平台,用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)得分图进行关联研究,结果表明: 与对照组相比,培养基游离氨基酸代谢消耗谱能够区分两种不同机制的抗癌药物,为抗癌药物筛选过程中的药物作用机制预归类提供了一种新的技术方法。同时,这种以外观内的方法具有方便、经济的特点。

关键词: 高效液相色谱;氨基酸消耗谱;紫杉醇;丝裂霉素;HeLa细胞;代谢组学

文章编号: 1000-8713(2011)04-0330-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12919.shtml 

变性高效液相色谱法在α-血红蛋白稳定蛋白基因检测中的应用

王志鹏*

(暨南大学医学院微生物与免疫学教研室, 广东 广州 510632)

摘要: 建立了采用变性高效液相色谱(DHPLC)对α-血红蛋白稳定蛋白(AHSP)基因进行基因分型和突变筛查的新方法。将AHSP基因序列分成6个片段,因第一、二、四、六个片段均含有1～2个常见单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点,需单个标本分别进行检测;第三、五个片段不含有常见SNP位点,采用DHPLC结合DNA(脱氧核糖核酸)池的方法进行检测。以基因测序为金标准对所建立的AHSP基因检测方法进行方法学评价,结果显示: 40个样品的DHPLC检测结果与测序结果之间完全吻合,说明所建立的检测方法能对AHSP基因6种常见SNP进行准确基因分型。应用DHPLC对365个样品的AHSP基因进行检测,发现2个罕见SNP(11810 G＞A和12802 C＞T);同时还发现2个错义突变(AHSP D29V和AHSP V56G), AHSP D29V突变为新突变,AHSP V56G为罕见突变。结果表明采用DHPLC法可有效地对AHSP基因进行基因分型和突变筛查。

关键词: 变性高效液相色谱;α-血红蛋白稳定蛋白基因;基因分型;突变筛查

文章编号: 1000-8713(2011)04-0335-07

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12891.shtml 

亲水作用色谱法测定组织中全基因组DNA甲基化水平

张良滔, 张立坚, 张俊杰, 刘春安, 蔡春*

(广东医学院, 广东 湛江 524023)

摘要: 建立了亲水作用色谱(HILIC)测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚-氯仿提取组织中的DNA,提取的DNA用88%甲酸在140 ℃下裂解,经N2吹干后,加乙腈-水(9:1, v/v)溶解,用Waters BEH HILIC柱进行分离,在277 nm波长下检测胞嘧啶(Cyt)及5-甲基胞嘧啶(5-mCyt)含量。结果表明,以乙腈-10 mmol/L甲酸铵溶液(94:6, v/v)为流动相,流速为0.5 mL/min, Cyt与5-mCyt分离较好,保留时间分别为2.6与3.1 min。胞嘧啶的线性范围为1～900 μmol/L,相关系数为0.9999; 5-甲基胞嘧啶的线性范围为1～64 μmol/L,相关系数为0.9998。胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为54 nmol/L(柱中为0.54 pmol),定量限为250 nmol/L(柱中为2.5 pmol);在5～900 μmol/L的添加水平下,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的平均加标回收率为94.7%～100.5%,相对标准偏差小于1.48%。用该方法检测了结肠癌组织中DNA甲基化水平,结果显示该癌组织中全基因组的DNA甲基化均值为4.0%。该方法快速、简单,稳定性好,灵敏度较高,能满足全基因组DNA甲基化的检测要求。

关键词: 亲水作用色谱;全基因组DNA甲基化;组织；结肠癌

文章编号: 1000-8713(2011)04-0342-04

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12867.shtml 

研究论文

超高效液相色谱-串联质谱法测定人参中磺酰脲类除草剂残留量

李娜, 李辉, 邵辉, 刘磊, 张玉婷, 郭永泽*

(天津农业科学院中心实验室, 天津 300381)

摘要: 建立了人参中15种磺酰脲类除草剂残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品中残留的农药经乙腈提取、石墨化炭黑(ENVI-Carbon)固相萃取柱净化后,使用含1%(v/v)甲酸的甲醇-二氯甲烷(20:80, v/v)洗脱,UPLC分离,最后采用电喷雾串联质谱在正离子多反应监测(MRM)扫描模式下进行测定。15种农药在2～100 μg/L的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数在0.996和0.999之间。对人参中15种农药在5、25和50 μg/kg 3个添加水平下的回收率进行了测定,其平均回收率在84.9%和104.3%之间,相对标准偏差在2.4%和11.9%之间。各种农药的定量限均为5 μg/kg。该方法操作简便,净化效果好,灵敏度、准确度和精密度均符合多残留检测技术的要求,可为中药材中磺酰脲类除草剂污染状况调查提供检测方法支持。

关键词: 超高效液相色谱-串联质谱法;磺酰脲类除草剂;人参

文章编号: 1000-8713(2011)04-0346-07

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12906.shtml 

气相色谱-质谱法测定纺织助剂中的有机锡

李艳明1, 胡勇杰2*, 刘金华1, 郭玉良1, 王桂琴1

(1. 广东德美精细化工股份有限公司, 广东 顺德 528305; 2. 广东产品质量监督检验研究院, 广东 广州 510308)

摘要: 建立了纺织助剂中二丁基锡(dibutyltin, DBT)、三丁基锡(tributyltin, TBT)及三苯基锡(triphenyltin, TPhT)化合物的气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)检测方法。在乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 4.0)中,用正己烷超声萃取(对疏水性样品)或振荡萃取(对亲水性样品)试样中的有机锡,然后以四乙基硼化钠的四氢呋喃溶液为衍生化试剂进行衍生化,用GC-MS测定,依据保留时间和选择离子定性,外标法定量。实验结果表明,在0.1～8.0 mg/L(对于DBT和TBT)或0.1～4.0 mg/L(对于TPhT)的范围内,有机锡化合物的浓度（以有机锡阳离子计）与其衍生物峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数(r2)为0.9994～0.9998,检出限为0.003～0.005 mg/L; 4种聚氨酯类助剂基质中3种有机锡化合物的平均加标回收率为92.6%～108.0%,相对标准偏差为2.5%～10.2%。该方法的技术指标满足纺织助剂中有机锡化合物的测定要求。

关键词: 气相色谱-质谱法;有机锡;纺织助剂

文章编号: 1000-8713(2011)04-0353-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12885.shtml 

高效亲和色谱法测定2种中药成分与人血清白蛋白的结合率

蔡晓明1, 张岩2, 于龙1, 郭志谋1, 张秀莉1*, 梁鑫淼1

(1. 中国科学院大连化学物理研究所, 中国科学院分离分析重点实验室, 辽宁 大连 116023; 2. University of Califonia-Irvine, CA 92697-4625, USA)

摘要: 采用高效亲和色谱技术(HPAC)对中药成分与人血清白蛋白(HSA)的相互作用进行了研究。首先采用点击化学的方法制备了表面键合有HSA蛋白的硅胶固定相并装填成亲和色谱柱,根据药物在该色谱柱上与空白硅胶柱上的保留时间差计算得到药物与蛋白的结合率。利用该方法测得模型化合物华法令与HSA的结合率与文献中采用超滤法测得的结果基本一致,表明该方法可用于测定药物与HSA的结合率。在此基础上用该方法测定了葛根素和告依春两种中药成分与HSA的相对结合率分别为10.26%和10.20%。同时用超滤的方法测定了葛根素与HSA的结合率为14.25%。结果表明,HPAC可以作为研究药物与蛋白相互作用的一种简便可行的方法,其测定结果与超滤方法一致。

关键词: 高效亲和色谱法;人血清白蛋白;葛根素;告依春;结合率;超滤

文章编号: 1000-8713(2011)04-0358-04

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12905.shtml 

技术与应用

毛细管电泳法测定阿霉素脂质体药物中的微量硫酸根离子

展学强1, 朱智甲1, 康经武2*(1. 东华大学化学化工与生物工程学院, 上海 201620; 2. 中国科学院有机化学所, 上海 200032)

摘要: 建立了以硝酸钾作为背景电解质测定阿霉素脂质体药物中微量硫酸根离子的毛细管电泳分析法。考察了分离电压、背景电解质、电渗流改性剂浓度、pH值对分离测定的影响。结果表明,当毛细管长度为60 cm(有效长度51.5 cm)、分离电压为~15 kV、缓冲溶液采用20 mmol/L硝酸钾(pH 7.0)、电渗流改性剂采用0.4 mmol/L十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)、检测波长为202 nm时,阿霉素脂质体破乳液中硫酸根离子和氯离子在3 min内得到了基线分离,硫酸根离子迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别小于0.01%和1.0%,检出限为5 μg/L。用该方法对阿霉素脂质体样品中的微量硫酸根离子进行了分析测定,结果令人满意。

关键词: 毛细管电泳法;间接紫外检测;阿霉素脂质体;硫酸根离子

文章编号: 1000-8713(2011)04-0362-03

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12922.shtml 

高效液相色谱法分离双手性中心β-氨基酮旋光异构体

李蓬勃1, 田又平1, 陈立仁2, 徐峰1*

(1. 大分子科学陕西省重点实验室, 陕西师范大学化学与材料科学学院, 陕西 西安 710062; 2. 中国科学院兰州化学物理研究所, 甘肃 兰州 730000)

摘要: 建立了使用AE. Lichrom AM 1手性色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)直接拆分含有双手性中心的β-氨基酮类化合物的4个旋光异构体的方法。考察了流动相的极性大小、洗脱方式及流速等因素对异构体拆分的影响,确定了分离β-氨基酮类化合物异构体的最佳分离条件: 流动相为正己烷/异丙醇,洗脱模式为二元高压梯度洗脱,流速为1 mL/min。在上述色谱条件下,完成了4种含双手性中心的β-氨基酮类化合物的4个旋光异构体的基线分离(Rs＞1.5)。结果表明该方法可快捷、简便地分离双手性中心β-氨基酮类化合物的4个旋光异构体。

关键词: 高效液相色谱;β-氨基酮类化合物;旋光异构体；拆分

文章编号: 1000-8713(2011)04-0365-03

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12887.shtml 

9-蒽醛衍生化-高效液相色谱法拆分α-氨基酸甲酯和几种脂肪胺对映体

金京玉1*, 黃虎2, 李元宰2*

(1. 浙江普洛家园药业有限公司, 浙江 东阳 322118; 2. 朝鲜大学校药科大学, 韩国光州广域市501-759)

摘要: 采用高效液相色谱法,以9-蒽醛为衍生试剂,在5种多糖衍生物的手性固定相(CSPs)上对几种α-氨基酸甲酯对映体进行了手性分离。色谱条件如下: 流动相为含3%～10%(v/v)异丙醇的正己烷溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。结果表明,α-氨基酸甲酯-9-蒽醛亚胺衍生物在Chiralcel OD柱或Chiralcel OD-H柱上的手性分离结果优于其他CSPs,而且在Chiralcel OD柱或Chiralcel OD-H柱上全部得到了基线拆分(α=1.24～5.47, Rs=2.56～13.90), L-对映体在这两种色谱柱上的保留强于D-对映体。同时还考察了几种脂肪胺在5种多糖衍生物手性固定相上的对映体拆分效果,结果表明脂肪胺的9-蒽醛亚胺衍生物在Chiralcel OD柱或Chiralcel OD-H柱上的分离效果良好。该法可用于其他α-氨基酸酯和胺类化合物对映体的分析。

关键词: 高效液相色谱法;手性固定相;对映体拆分;氨基酸甲酯;9-蒽醛亚胺衍生物

文章编号: 1000-8713(2011)04-0368-05

文章详细内容：http://www.chrom-china.com/CN/abstract/abstract12884.shtml 

《色谱》2011年第04期_目次.pdf